TUNEL檢測實驗原理
細胞在發生凋亡時,會激活一些DNA內切酶,這些內切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細胞凋亡時抽提DNA進行電泳檢測,可以發現180-200bp的DNA ladder?;蚪MDNA斷裂時,暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上熒光素 (FITC) 標記的dUTP (fluorescein-dUTP) ,從而可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀進行檢測,這就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法檢測細胞凋亡的原理。
TUNEL檢測實驗切片
TUNEL檢測(石蠟切片) | 取下適當的新鮮的組織塊固定于4%-10%濃度的多聚甲醛或中性甲醛中,甲醛與組織塊體積比在10:1和20:1之間,4攝氏度保存運輸; |
TUNEL檢測(冰凍切片) | 取下的新鮮組織應立即放入超低溫冰箱或者液氮中,用干冰運輸,固定好的切片應于-80或者-20度保存,并盡快用于檢測; |
TUNEL檢測(細胞爬片) | 細胞爬片4%多聚甲醛4度固定30min,換PBS緩沖液4度保存運輸,盡快用于檢測; |
熒光法需要先拍一張凋亡熒光圖,再拍一張原位染核圖,再合并圖層,終我們提供的為三張熒光圖片。
伊萊博生物擁有豐富的研究經驗,具備完善的系統化管理能力和科研服務體系。目前已自建細胞、分子、病理等實驗平臺近1000平方米,擁有先進的儀器設備、細胞庫、樣本保存庫等。動物實驗中心近1800平方米,可滿足同時飼養清潔級和SPF級動物。核心實驗技術團隊主要來自中國科學院大學、復旦大學、上海交通大學等重點高校及科研機構,能夠為客戶提供研究方案策劃、項目實施及項目深度分析等方面的技術支持。公司目前參與研究項目已經涵蓋心腦血管、腫瘤、內分泌、生殖、免疫、神經等諸多領域。